大多数细胞在
msc无血清培养基中单独培养时都不能增殖,它们需要补充额外的生长因子和细胞因子,如激素、转运蛋白、微量元素或ECM因子。激素如胰岛素、生长激素等胰岛素作为一种多肽激素,对哺乳动物细胞具有多效合成作用,促进葡萄糖和氨基酸摄取、脂肪生成、单价阳离子和磷酸转运、蛋白质和核酸合成。转运蛋白,如转铁蛋白,转铁蛋白作为铁的载体,也有助于降低氧自由基和过氧化氢的毒性水平。ECM因子是某些贴壁生长细胞所必需的组分,如纤连蛋白、胶原蛋白、层粘连蛋白等。
下面为大家分享一下msc无血清培养基的使用注意事项:
1、细胞培养用水一般为三蒸水(经石英蒸馏器蒸馏)或超纯水,生产上一般为注射用水。
2、建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用,因为包装一旦打开,组分可能会变质或因受潮而结团。
3、溶解干粉培养基时先加入终体积90%-95%的培养用水,添加剂加完后再补足。
4、如需添加的组分较多时,某一组分*溶解后,再添加另一组分。
5、待msc无血清培养基溶解后再加入碳酸氢钠,以免产生沉淀。
6、所有成分溶解后,培养基应立即过滤或高压除菌,以免产生沉淀或有微生物污染。
7、在过滤除菌时,一般情况下应调pH比所需值低0.1~0.2个单位,因过滤除菌后,pH值会升高约0.2。
8、在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。
9、建议用1NHCl或1NNaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠来调对培养液的渗透压影响比较大。